4， 灭菌验证的方法

　　灭菌过程的验证和常规控制的相关内容包括灭菌设备的确认、灭菌工艺的验证、包装适用性、装载试验、空气过滤器的检查、蒸汽的质量及管理、真空检查和再验证周期等等内容。

4.1 在蒸汽灭菌验证进行之前，需要确认以下内容：

　　蒸汽灭菌器制造商的质量保证、
　　蒸汽灭菌器的检查、安装和性能确认、
　　安装于蒸汽灭菌器的空气过滤器的泄漏试验、
　　空气流速或流型试验（若必需）、
　　压力或真空度测试、
　　蒸汽质量测试（若必需）、
　　生物指示剂（化学指示剂）的挑战性试验、
　　不同装载的验证、
　　升温时间的控制（若必需）、
　　保温时间内的温度波动范围、
　　对灭菌器进行热分布/热穿透测试仪器的校准，
　　IQ/OQ/PQ的方案
　　具备证实能够进行IQ、OQ和PQ的所有内容并能对偏差进行处理及纠正的能力。

4.2 一般来说：验证（IQ/OQ/PQ）必须包含：
4.2.1被测灭菌设备和公用系统的测试必须包含：
1.1 灭菌设备供应商的评价；
1.2 灭菌设备的容积、真空度、压力以及泄漏率；
1.3 用什么作为灭菌介质（如蒸汽、高压空气、过热水等）并能证实有效；
1.4 灭菌设备如有夹层、夹层与气室之间的压力与温度保持在什么水平上是安全的；
1.5 使用何种类型的过滤器？多长时间进行挑战性试验？[separator]
1.6 使用何种类型的监测和控制传感器？如何校正？是否符合相关规定？
1.7 如灭菌设备中装有蒸汽分流器，则必须消除系统运行安全的风险；
1.8 时间、温度、压力、压力消减速率的控制（若必需）；
1.9 空气质量、水质量的控制以及报警（若必需）；
1.10  以上所有情况的变化是否评价再验证的必要；

4.2.2  对灭菌工艺的验证必须包含：
2.1 空载热分布研究
2.2 热穿透研究
   每种装载容器的每种装载方式；
   每种方式的运行次数；
   每种方式的冷点是否确定；
2.3 升温、降温速度对生产工艺、产品的影响；
2.4 喷淋冷却速度对被灭菌产品的影响；
2.5 冷却用水是否能有效地控制微生物；
2.6 温度测量系统是否提供每一个测点的打印数据；
2.7 温度测量系统是否每次运行都进行前后校正；
2.8 温度测量系统的校正是否符合相关规定；
2.9 生物指示剂的使用：
   类型；
   来源；
   密度和D值；
   是否采用生物负载法？是否测试被灭菌产品的初始菌？
   如发生意外（阳性），如何处理；
2.10 若出现热穿透偏差如何处理；
2.11 若必需，提供污染菌（微生物负载）的特性及鉴别；微生物负载的报警及采取措施的限度；生物指示剂的鉴别、耐热性及稳定性；污染菌与生物指示剂耐热性的比较；微生物挑战性试验，用以证明在最短的灭菌周期内在最差条件下（如产品处在生物指示剂最难杀灭的位置或它属于最难灭菌的产品或二者兼备的情况）；
2.12 对过度杀灭的风险分析及管理；
2.13 灭菌后的干燥程序对灭菌效果的影响；
2.14研究产品耐受性变更导致的灭菌工艺变化；
2.15总体评价并指导最佳灭菌效果的装载量；
2.16 验证及其相关项目的培训

4.2.3  对于灭菌工艺的验证，应符合以下规定：
1， 保温时间内温度波动应在±0.5℃~±1.0℃之内（环境温度变化变化应尽可能小）；
2， 保温时间内压力波动应在±5Kpa之内（若必需）；
3， 灭菌工艺验证包含最小装载、饱和装载和典型装载三种；或者采用最大装载，最小装载和混合装载的兼容性研究；
4， 极限最低温度与最大值相差不大于3K；
5， 等效灭菌时间的偏差不大于15s（对最大的灭菌设备不大于30s）；
6， 空气过滤器的流速应不大于0.13Kpa/min（若必需）；
7， 空气移除速度的检查（若必需，适合多孔/坚硬物质）；
8，  生物指示剂的布置；
9，  若必需，则需测被灭菌物品的初始菌（微生物负载）；
10，  以冷点为控制温度；即确认所有测点均达到灭菌温度后才计算标准灭菌时间。

5， 灭菌验证形成的相关文件

5．1 相关文件要点
　　以下是对蒸汽灭菌器或蒸汽-湿热灭菌工艺的相关验证文件的分类，可以根据实际情况作出筛选，但必须评估相关内容是否完整：

　　灭菌器制造商及其设备信息；
　　灭菌器的安装报告；
　　首次灭菌的情况、所有操作及控制文件，包括仪表、阀门、报警装置以及相关设施的校验等；
　　产品的安全耐受性研究报告
　　真空度以及压力保障措施的验证
　　泄漏率测试报告
　　蒸汽、水、压缩空气等辅助系统的质量测试报告
　　包含冷点、装载分布、热分布、热穿透等项目研究的IQ、OQ、PQ方案及报告
　　对验证结果的总结和风险分析，提出装载指导报告
　　完整的操作记录（也可以是表格）
　　维护保养程序以及记录，包含预防性维护、条件维护等内容
　　任何变更、任何故障的处理报告
　　培训记录以及效果评价报告
　　再验证周期的规定
　　其他

5．2 验证文件要点
　　灭菌参数与被灭菌物品特性的确认
　　真空度（泄漏率）
　　蒸汽灭菌的初始菌控制（灭菌前物品的生物负荷的数量）
　　蒸汽灭菌中对于水、空气过滤器等的要求
　　产品的安全耐受值
　　对过度杀灭的限制
　　挑战试验
　　再验证周期
　　新的灭菌工艺的开发
　　验证实施步骤
　　偏差处理、风险分析以及验证报告
　　其他